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技術文章
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高保真DNA聚合酶的定義及如何選擇
2022-11-08
DNA聚合酶是PCR反應中*組成部分，是參與DNA復制中的重要酶，被用在生物及醫(yī)學等領域的各個研究方向上。PCR技術發(fā)明至今40多年的時間里，從早期被發(fā)現(xiàn)的TaqDNA聚合酶到現(xiàn)在，酶越來越多樣化。隨著新酶的發(fā)現(xiàn)和對舊酶的改造，DNA聚合酶的保真性、特異性、靈敏度等都獲得了明顯的改進。而高保真DNA聚合酶的出現(xiàn)正是順應了市場需求，下面小編將圍繞高保真DNA聚合酶的作用原理和應用方向等進行介紹。一、什么是什么是高保真酶高保真DNA聚合酶有聚合中心和酶切中心，聚合中心具有5'→3...
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李記生物細胞轉染試劑常見問題（一）
2022-11-07
涉及產(chǎn)品EZTransPlus細胞轉染試劑（Ⅱ）貨號：AC04L011EZTrans細胞轉染試劑（高效）貨號：AC04L091/AC04L092EZTrans細胞轉染試劑（低毒）貨號：AC04L098/AC04L099其他轉染產(chǎn)品EZTransPro細胞轉染試劑（GMP）貨號：AC04L032/AC04L033/AC04L034EZTransRNA轉染試劑貨號：AC04L051李記生物細胞轉染試劑常見問題（一）Q1：李記有3款轉染試劑，這3款有什么區(qū)別？和Li**對比效果如何...
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細胞凍存是細胞保存的主要方法之一
2022-10-31
細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種，起到了細胞保種的作用。除此之外，還可以利用細胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細胞。細胞凍存時向培養(yǎng)基中加入保護劑--終濃度5%．15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO)，可使溶液冰點降低，加之在緩慢凍結條件下，細胞內(nèi)水分透...
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MH培養(yǎng)基的原理及用法
2022-10-20
MH培養(yǎng)基為MH瓊脂培養(yǎng)基，微生物中所指的MH是Mueller-Hinton的首字母縮寫，指的是水解酪蛋白。所以MH培養(yǎng)基也成為水解酪蛋白培養(yǎng)基。常用作培養(yǎng)基原材料，提供細菌生長所需的生長因子。MH培養(yǎng)基的原理：牛肉粉和酸水解酪蛋白提供氮源、維生素和氨基酸；可溶性淀粉吸收有毒的代謝產(chǎn)物。MH培養(yǎng)基的成分：酸水解酪蛋白/酸水解酪素17.5g牛肉浸膏粉2g淀粉1.5g瓊脂12gMH培養(yǎng)基的用法：稱取本品21.0g,加熱溶解于1000ml?蒸餾水中,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。...
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介紹幾種常見的細胞轉染方法
2022-09-28
細胞轉染技術主要分為三大類：化學法、物理法及生物學法。但是沒有一種方法是放之四海而皆準的，即沒有任何方法適用于所有細胞和所有實驗。因而只有依據(jù)自己的實驗要求選擇理想的方法，才能獲得漂亮的實驗結果。下面介紹幾種常見的細胞轉染方法：1、DEAE-右旋糖苷法常言道：同性相斥，異性相吸。因而，當帶正電的DEAE-右旋糖苷與核酸中帶負電的磷酸骨架相遇，妥妥的火花四射，而后會被細胞膜抱團相擁并通過細胞內(nèi)吞作用迎客到家。該法可用于瞬時轉染，操作相對簡單、結果可重復，但是對細胞有一定的毒副作...
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分析影響細胞轉染效率的因素
2022-09-27
細胞轉染指的是將外源分子如DNA、RNA等導入到真核細胞內(nèi)部的技術。隨著基因和蛋白功能研究的深入，轉染已經(jīng)成為科研實驗中常用的技術手段之一。對于細胞轉染實驗，轉染試劑、轉染方法、細胞狀態(tài)等都會影響到細胞轉染的效率，本文主要對影響細胞轉染效率的8個因素做一介紹。1.轉染試劑瞬時轉染和穩(wěn)定轉染可以選擇不同的轉染試劑，轉染試劑的選擇又可以根據(jù)已經(jīng)發(fā)表的文獻，已經(jīng)有很多細胞株被成功轉染，通過文獻資料可以參考最適的轉染試劑，當然也要根據(jù)不同的實驗需求選擇。一般來說轉染試劑的要求是低毒，...
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胎牛血清使用中的常見問題解答
2022-09-19
1、如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。長時間儲存在2-8℃時，血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此，推薦在-20℃以下儲存血清，并避免反復凍融。我們建議血清應保存在-2O℃。若存放于4℃時，請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶，建議無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。2、血清中包含絮狀...
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提高細胞轉染效率的方法有哪些？
2022-09-15
轉染是將外源性基因?qū)爰毎麅?nèi)的一種專門技術。分為物理介導方法：電穿孔法、顯微注射和基因槍；化學介導方法：如經(jīng)典的磷酸鈣共沉淀法、脂質(zhì)體轉染方法、和多種陽離子物質(zhì)介導的技術；生物介導方法：有較為原始的原生質(zhì)體轉染，和現(xiàn)在比較多見的各種病毒介導的轉染技術。理想細胞轉染方法，應該具有轉染效率高、細胞毒性小等優(yōu)點。病毒介導的轉染技術，是目前轉染效率較高的方法，同時具有細胞毒性很低的優(yōu)勢。但是病毒轉染方法的準備程序復雜，常常對細胞類型有很強的選擇性，在一般實驗室中很難普及。其它物理和化...
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